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Extracción casera de ADN


Jp Neira

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Hahaha que buena, yo una vez hice un experimente en un lab. De biología de la cato :BBB y sacamos ADN humano y volas, con unos detergentes extraños y cloroformo :rasta: hahah, la cosa es que después eso se mete como en unas maquinas que le pasan corriente y el ADN se estira ._. Lo vez como más oscuro en algunas partes dependiendo de la cantidad que este concentrado en esa parte. Gracias por el aporte amigo :banana:

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  • 9 months later...

Es más fácil con frutillas, ni siquiera hay que pasarlas por la licuadora... Nosotros lo hicimos así (resumido):

 

 

- En el mortero, poner 1 gramo de sal NO YODADA (NaCl puro), 9ml de agua destilada y 1 ml de detergente líquido. Luego, la muestra de la que queremos obtener ADN (cebolla, frutillas, lo que quieran; es un trozo de unos 5 mm. Macerar.

La solución de sal y detergente rompe las paredes de lípidos de las células para liberar el citoplasma y los demás contenidos celulares. La sal protege los extremos negativos de los fosfatos de la membrana celular. La acción de macerar ayuda a romper las membranas celulares y las paredes celulares.

- Agregar 2 gramos de ablandador de carne, 8 ml de agua destilada, macerar. El ablandador de carne contiene enzimas que desnaturalizan las proteínas que unen el ADN y que podrían contaminar la extracción

- Colocar la mezcla en un tubo de ensayo y ponerlo en un abaño de agua caliente a 55°C – 60 °C por 10 minutos. Si el agua no se mantiene a esa temperatura, o se calienta por más de 10 minutos, el ADN puede desintegrarse.

El tratamiento de calor suaviza los fosfolípidos en la membrana celular y desnaturaliza las enzimas de ADN, las cuales, si están presentes, podrían cortar el ADN en pequeños fragmentos y no podría ser extraído.

Enfriar la mezcla en un baño de hielo por 5 minutos. Filtrar el lisado usando un paño de gasa, recibirlo en un tubo de ensayo plástico limpio y seco. Cuidadosa y lentamente escurrir por el borde del tubo 10 ml de etanol frío, con la idea de formar una capa de alcohol visible sobre el lisado. Inmediatamente comenzarán a formarse burbujas alrededor de las hebras (nebulosas) de ADN. Mover suavemente el tubo de ensayo para que salgan más hebras de ADN hacia la solución de alcohol

 

Introducir, moviéndola en espiral, una varilla o bagueta hasta la interfase alcohol-lisado y colectar el ADN mucoso para colocarlo en un tubo limpio con 95% etanol.

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  • 3 weeks later...
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